Определение резус-фактора или группы крови человека моноклональными антителами с высокой специфичностью (цоликлонами) используется при первичном исследовании или при наличии экстренных показаний к трансфузии. Это относительно простой современный способ, который не требует специальной подготовки лаборанта.
Особенности цоликлонов
Моноклональные антитела, которые являются основой цоликлонов, относятся к иммуноглобулинам класса М. Их получают от стерильных малышей в лабораторных условиях, благодаря чему исключается возможность попадания в препараты патогенных для людей вирусов.
В цоликлонах моноклональные антитела смешиваются с солевым раствором. Реагенты цоликлоны анти-А и анти-В получают посредством гибридомной технологии – слияния антителообразующих B-лимфоцитов с клетками миеломы (опухоли) грызунов. Гибридомные клеточные линии каждого животного вырабатывают тела одного класса иммуноглобулинов – они идентичны по своей биологической активности и структуре. Все антитела, которые выработаны клетками мышей из одного потомства, – моноклональные.
Раковые клетки грызунов используют потому, что они способны неограниченно делиться, в то время как обычные здоровые клетки погибают уже через несколько делений. Поэтому для получения цоликлонов берут гибридомы (гибриды клеток) – они представляют собой соединения в питательной среде раковых клеток миеломы и обычных лимфоцитов. Последние сохраняют жизнеспособность в такой среде, а от клеток миеломы перенимают возможность активно размножаться. При таком бесконечном делении и вырабатываются моноклональные антитела.
Форма выпуска, условия хранения
Солевые растворы цоликлонов Анти-А, В выпускаются в виде жидкости соответствующего цвета – красного или синего. В препаратах с маркировкой D оттенок отсутствует.
Реагенты упакованы в пластиковые флаконы объемом по 10 мл с капельницей для дозирования или в стеклянные флаконы меньшего объема – по 5 мл. Консервантом выступает азид натрия, конечная концентрация которого составляет 0,1%.
Реагенты можно хранить в течение 2 лет при температуре не выше 8°С. Вскрытые – при той же температуре максимум 30 дней с закрытым флаконом.
Область применения
Основное назначение цоликлонов – проведение типирования крови для определения как резус-фактора, так и группы крови. Исследования выполняют в лабораторных условиях.
Такие генетически обусловленные показатели крови, как резус фактор и группа крови, можно определить не только с помощью цоликлонов. Но использование их в системе АВ0 позволяет максимально быстро определить эти параметры путём оценки агглютинации:
при первой группе агглютиноген отсутствует в крови, во время оценки результатов видно, что реакции нет ни в одном образце реагента, смешанного с кровью;
если эта реакция наблюдается в образце с реагентом анти-А, кровь имеет вторую группу;
если эритроциты склеиваются в образце с анти-В – группа крови третья;
когда агглютинация есть во всех образцах, у исследуемого материала четвертая группа.
Реагенты анти-D Супер или D IgM используют для уточнения резус-принадлежности. Агглютинация при их применении происходит в большинстве D-положительных образцов биоматериала кроме крови с частичным антигеном DVI. Цоликлоны анти-D IgG применяют для уточнения результатов, если нет агглютинации при использовании реагента анти-D IgM.
Цоликлоны чувствительны к внешнему воздействию, поэтому при их применении нужно соблюдать определенные правила – учитывать температуру окружающей среды, чистоту, сроки и нормы хранения.
